Lupita Amondi Nyong'o, 1 Mart 1983 tarihinde Meksiko Şehri, Meksika'da Kenyalı ebeveynler olan Dorothy Ogada Buyu ve Peter Anyang' Nyong'o'nun çocuğu olarak dünyaya geldi. Babası, bir senatör olan Nyong'o, o dönemde siyaset bilimi alanında konuk öğretim üyesiydi. Lupita, Kenya'da büyüdü. 16 yaşında, ebeveynleri onu yedi ay boyunca İspanyolca öğrenmek için Meksika'ya gönderdi. New Hampshire'daki Hampshire College'da film çalışmaları okudu ve birkaç filmde yapım asistanı olarak çalıştıktan sonra, Yale Drama Okulu'nun oyunculuk programından mezun oldu. 2013 yılında, usta yönetmen Steve McQueen'in 12 Yıllık Esaret (2013) filminde köle Patsey rolüyle bir anda ulusal ve uluslararası arenada tanınan bir oyuncu oldu. Bu performansı ile 80’den fazla dalda adaylık elde etmesinin yanı sıra En İyi Yardımcı Kadın Oyuncu dalında Akademi Ödülleri’ne aday gösterildi ve ilk Oscar’ını bu sayede kazanmış oldu. Ayrıca, MTV'nin ödüllü drama dizisi Shuga'da (2009) başrolde yer aldı, gerilim filmi Non-Stop'ta (2014) ve yüksek bütçeli filmler Star Wars: Güç Uyanıyor (2015) ve Orman Çocuğu'nda (2016) kamera karşısına geçti. Lupita'nın tiyatro sahnesine çıktığı işler arasında ise "The Winter's Tale"de "Perdita" rolü (Yale Repertory Theater), "Uncle Vanya"da "Sonya" rolü, "The Taming of the Shrew"da "Katherine" performansı ve Michael Mitnick'in "Elijah" adlı prodüksiyonları sayılabilir. Lupita, 2018'de kadın baş karakter Nakia rolünü oynadığı süper kahraman filmi Black Panther'da (2018) yer aldı. Takip eden yıllarda Star Wars: Forces of Destiny (2017), Little Monsters (2019), Biz (2019), Black Is King (2020), Kod 355 (2022), Black Panther: Yaşasın Wakanda (2022) ve Sessiz Bir Yer: Birinci Gün adlı projelerde yer aldı ve Big Mouth (2017) ve Human Resources (2022) gibi tv dizilerinde seslendirme yaptı.