19 Şubat 1967'de San Germán, Porto Riko'da esas adı olan Benicio Monserrate Rafael del Toro Sánchez ismiyle dünyaya gelen Benicio Del Toro genç yaşta oyunculuğa ilgi duysa da babasının yönlendirmesi ile San Diego University of California’da işletme eğitimi aldı. Bu sırada seçmeli drama derslerinde oyunculuğa olan tutkusunu keşfettikten sonra, Los Angeles ve New York'ta ünlü oyunculuk koçlarından eğitim almak için üniversiteyi bıraktı. Del Toro'nun oyunculuk kariyeri, sinemaya geçmeden önce 1980'lerin sonunda küçük televizyon rolleriyle başladı. Oyuncunun çıkış rolü ise 1995 yılında eksantrik dolandırıcı Fred Fenster'ı canlandırdığı "The Usual Suspects" filmi ile geldi ve bu performansı kendisine Independent Spirit Ödülü'nü kazandırdı. Bu başarısının arkasından "Fear and Loathing in Las Vegas" (1998), "Snatch" (2000) ve Silahların Gölgesinde (2000) gibi bağımsız ve büyük stüdyo filmlerindeki rolleri eldi. Yine 2000 yılında Steven Soderbergh imzalı "Traffic" filmindeki Meksikalı bir sınır polisini canlandırdığı, Javier Rodríguez performansı ile büyük beğeni topladı ve bu performansı kendisine En İyi Yardımcı Erkek Oyuncu dalında Akademi Ödülü, Altın Küre ve Screen Actors Guild ödüllerini getirdi. İlerleyen yıllarda Benicio Del Toro "21 Grams" (2003), "Sin City" (2005) ve Cannes Film Festivali'nde En İyi Erkek Oyuncu ödülünü ve Goya Ödülü'nü kazandığı "Che" (2008) filmlerindeki rolleriyle uluslararası camiada ününü daha da pekiştirdi. Sonraki yıllarda "Sicario" (2015) ve devam filmi "Sicario: Day of the Soldado" (2018) filmlerinde canlandırdığı Alejandro Gillick karakteri ile etkileyici performansıyla eleştirmenlerden övgü topladı. Ayrıca Marvel Sinematik Evreni'ne farklı filmlerde canlandırdığı The Collector (Koleksiyoncu) karakteri ile dahil oldu ve "Star Wars: The Last Jedi "da (2017) DJ'i canlandırdı. 2021'de Wes Anderson'ın "The French Dispatch" filminde Moses Rosenthaler rolüyle yer alan Del Toro, En son Reptile (2023), All-Star Weekend, The Phoenician Scheme ve White Lies adlı yapımlarla anıldı.